脂質體2000轉染細胞實驗材料及操作步驟
更新時間：2014-12-05 | 點擊率：3556
一、脂質體2000轉染細胞實驗材料：
1、Vero細胞
2、轉染級質粒
3、DMEM細胞培養液：無血清DMEM、10%血清DMEM
5、6孔細胞培養板
二、脂質體2000轉染細胞實驗操作步驟：（以6孔板為例予以說明）
1、細胞鋪板：轉染前一天進行鋪板，第二天待細胞長成單層即可進行轉染。（Vero細胞按一傳三的比例進行傳代，一般10~12h即可。）
2、溶液1：240ul無血清DMEM+10ullipofectamine2000perwell（總體積250ul）（溫育5min）
3、溶液2：無血清DMEM+4ug質粒perwell（總體積250ul）（根據質粒濃度確定DMEM的體積，但保證總體積為250ul）
4、將溶液1與溶液2混合，室溫下置20min。
5、與此同時，將6孔板中的細胞用無血清DMEM沖洗細胞兩遍后，加入1.5ml無血清培養基。
6、將溶液1與溶液2的混合液逐滴加入孔中，搖動培養板，輕輕混勻。在37℃、5％的CO2培養箱中培養5~6小時。
7、6小時后，更換10%血清的DMEM，在37℃、5％的CO2培養箱中培養48~72h檢測轉染水平。
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